Bis Monoacylglyc ro Phosphate acide docosahexa no que et

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INSA Direction de la Recherche Ecoles Doctorales Quadriennal 2007 2010. SIGLE ECOLE DOCTORALE NOM ET COORDONNEES DU RESPONSABLE. CHIMIE CHIMIE DE LYON M Jean Marc LANCELIN Universit Claude Bernard Lyon 1. http sakura cpe fr ED206 b t CPE 43 bd du 11 novembre 1918 69622. VILLEURBANNE Cedex,T l 04 72 43 13 95 email lancelin hikari cpe fr. E E A ELECTRONIQUE M Alain NICOLAS Ecole Centrale de Lyon b t H9 36 av. ELECTROTECHNIQUE Guy de Collongue 69134 ECULLY,AUTOMATIQUE T l 04 72 18 60 97 Fax 04 78 43 37 17. http www insa lyon fr eea email eea ec lyon fr, E2M2 EVOLUTION ECOSYSTEMES M Jean Pierre FLANDROIS CNRS UMR 5558 Universit. MICROBIOLOGIE Claude Bernard Lyon 1 b t G Mendel 43 bd du 11 novembre. MODELISATION 1918 69622 VILLEURBANNE Cedex, http biomserv univ lyon1 fr E2M2 T l 04 26 23 59 50 Fax 04 26 23 59 49. email e2m2 biomserv univ lyon1 fr, EDIIS INFORMATIQUE ET M Alain MILLE Universit Claude Bernard Lyon 1 LIRIS.
INFORMATION POUR LA EDIIS b t Nautibus 43 bd du 11 novembre 1918 69622. SOCIETE VILLEURBANNE Cedex, http ediis univ lyon1 fr T l 04 72 44 82 94 Fax 04 72 44 80 53. emails ediis liris cnrs fr alain mille liris cnrs fr. EDISS INTERDISCIPLINAIRE M Didier REVEL H pital Cardiologique de Lyon b t Central. SCIENCES SANTE 28 av Doyen L pine 69500 BRON, http www ibcp fr ediss T l 04 72 68 49 09 Fax 04 72 35 49 16. email Didier revel creatis uni lyon1 fr, Mat riaux MATERIAUX DE LYON M Jean Marc PELLETIER INSA de Lyon MATEIS b t. http edml ec lyon fr Blaise Pascal 7 av Jean Capelle 69621 VILLEURBANNE. T l 04 72 43 83 18 Fax 04 72 43 85 28,email Jean marc Pelletier insa lyon fr. Math IF MATHEMATIQUES ET M Pascal KOIRAN Ecole Normale Sup rieure de Lyon 46. INFORMATIQUE all e d Italie 69364 LYON Cedex 07, FONDAMENTALE T l 04 72 72 84 81 Fax 04 72 72 89 69.
http perso ens email Pascal koiran ens lyon fr,lyon fr pascal koiran MathIF html. MEGA MECANIQUE ENERGETIQUE M Jean Louis GUYADER INSA de Lyon Laboratoire de. GENIE CIVIL ACOUSTIQUE Vibrations et Acoustique b t Antoine de Saint Exup ry 25 bis. http mega ec lyon fr av Jean Capelle 69621 VILLEURBANNE Cedex. T l 04 72 18 71 70 Fax 04 72 18 87 12,email mega lva insa lyon fr. ScSo ScSo M BRAVARD Jean Paul Universit Lyon 2 86 rue Pasteur. 69365 LYON Cedex 07,T l 04 78 69 72 76 Fax 04 37 28 04 48. email Jean paul bravard univ lyon2 fr, ScSo Histoire G ographie Am nagement Urbanisme Arch ologie Science politique Sociologie Anthropologie. Le bis monoacylglyc ro phosphate BMP est un phospholipide localis quasi exclusivement. dans les endosomes tardifs Il est impliqu dans le transport de macromol cules qui transitent. via ce compartiment cellulaire Nous montrons qu un anticorps anti BMP ainsi que. l accumulation de BMP dans des macrophages en culture alt re les flux du cholest rol issu. des lipoprot ines depuis les endosomes tardifs vers la membrane plasmique et le r ticulum. endoplasmique Par ailleurs le BMP incorpore s lectivement l acide docosahexa no que. DHA 22 6n 3 dont les b n fices cardiovasculaires ont t rapport s chez l Homme Notre. tude indique qu un apport lev de DHA in vitro ou in vivo stimule la formation de l esp ce. mol culaire 22 6 22 6 BMP Cette mol cule pr sente une grande sensibilit la peroxydation. ce qui lui conf re un r le protecteur vis vis de l oxydation du cholest rol Nous proposons. que le 22 6 22 6 BMP puisse agir comme un anti oxydant local au niveau des endosomes. Bis monoacylglycero phosphate BMP is a unique phospholipid preferentially found in late. endosomes of mammalian cells BMP is involved in the transport of macromolecules that. transit through this compartment We show that an anti BMP antibody or the accumulation of. BMP in cultured macrophages alters the redistribution of lipoprotein derived cholesterol from. late endosomes to plasma membrane and endoplasmic reticulum Moreover BMP selectively. incorporates docosahexaenoic acid DHA 22 6n 3 whose cardiovascular benefits have been. reported in Humans We here report that high supplementation of DHA both in vitro and in. vivo stimulate the formation of the 22 6 22 6 BMP molecular species This molecule is very. prone to peroxidation and as such is able to protect cholesterol against oxidation We. therefore propose that 22 6 22 6 BMP could act as a potential anti oxidant in its immediate. vicinity in endosomal membranes,AVANT PROPOS, Le travail pr sent dans ce m moire a fait l objet de publications scientifiques et a t.
pr sent par communications orales ou affich es lors de congr s scientifiques. Publications scientifiques avec comit de lecture, BOUVIER J ZEMSKI BERRY K A HULLIN MATSUDA F MAKINO A MICHAUD. S GELOEN A MURPHY R C KOBAYASHI T LAGARDE M DELTON. VANDENBROUCKE I Selective decrease of bis monoacylglycerol phosphate BMP in. macrophages by high supplementation with docosahexaenoic acid Journal of Lipid Research. 2007 Sous presse, DELTON VANDENBROUCKE I BOUVIER J MAKINO A BESSON N PAGEAUX. J F LAGARDE M et KOBAYASHI T Anti bis monoacylglycero phosphate antibody. accumulates acetylated LDL derived cholesterol in cultured macrophages Journal of Lipid. Research 2007 vol 48 n 3 pp 543 552,Publications scientifiques abstracts. BOUVIER J ZEMSKI BERRY K A MURPHY R C LAGARDE M KOBAYASHI T. DELTON VANDENBROUCKE I High docosahexaenoic acid content in. bis monoacylglycerol phosphate is associated with oxidative degradation of this. phsopholipid Chemistry and Physics of Lipids 2007 vol 149 Supplement p S57. BOUVIER J BESSON N MAKINO A PAGEAUX J F LAGARDE M KOBAYASHI. T DELTON VANDENBROUCKE I Characterization of lysobisphosphatidic acid issued. from phosphatidylglycerol in RAW macrophages Chemistry and Physics of Lipids 2005 vol. 136 Supplement p S132,Communications orales, BOUVIER J LAGARDE M DELTON VANDENBROUCKE I First evidence for the. biocellular significance of very high docosahexaenoic acid enrichment in. Bis Monoacylglycero Phosphate S minaire doctorant 2008 2009 de l IFR62 novembre. 2008 Facult de M decine RTH Laennec Lyon, BOUVIER J ZEMSKI BERRY K A HULLIN MATSUDA F MICHAUD S MURPHY.
R C KOBAYASHI T LAGARDE M DELTON VANDENBROUCKE I Selective. decrease of bis monoacylglycerol phosphate BMP in macrophages by high supplementation. with docosahexaenoic acid Groupe d Etude et de Recherche en Lipidomique GERLI 4 me. Congr s de Lipidomique octobre 2007 Toulouse,Communications affich es. HULLIN MATSUDA F BOUVIER J DELTON VANDENBROUCKE I MAKINO A. LAGARDE M KOBAYASHI T Cholesterol metabolism and transport are affected by the. late endosome lipid bis monoacylglycero phosphate The American Society for Biochemistry. and Molecular Biology ASMBM Special Symposio octobre 2008 Canmore CANADA. BOUVIER J ZEMSKI BERRY K A MURPHY R C LAGARDE M KOBAYASHI T. DELTON VANDENBROUCKE I High docosahexaenoic acid content in. bis monoacylglycerol phosphate is associated with oxidative degradation of this. phsopholipid International Conference on the Bioscience of Lipids the 48th ICBL. septembre 2007 Turku FINLANDE, BOUVIER J PAGEAUX J F KOBAYASHI T LAGARDE M DELTON. VANDENBROUCKE I Modifications of Bis Monoacylglycero Phosphate content in RAW. macrophages as a new approach to study its cellular role in cholesterol homeostasis Institut. Multidisciplinaire de Biochimie des Lipides IMBL 7 me journ e scientifique septembre. BOUVIER J BESSON N MAKINO A PAGEAUX J F LAGARDE M KOBAYASHI. T DELTON VANDENBROUCKE I Characterization of lysobisphosphatidic acid issued. from phosphatidylglycerol in RAW macrophages Groupe d Etude et de Recherche en. Lipidomique GERLI 3 me Congr s de Lipidomique mai 2006 Marseille. BOUVIER J BESSON N MAKINO A PAGEAUX J F LAGARDE M KOBAYASHI. T DELTON VANDENBROUCKE I Characterization of lysobisphosphatidic acid issued. from phosphatidylglycerol in RAW macrophages International Conference on the Bioscience. of Lipids the 46th ICBL septembre 2005 Ajaccio,LISTE DES FIGURES 13. LISTE DES TABLEAUX 16,LISTE DES ABREVIATIONS 17,INTRODUCTION GENERALE 18. RAPPELS BIBLIOGRAPHIQUES 21, Chapitre 1 M tabolisme et transport intracellulaires du cholest rol 22.
1 1 Le cholest rol 22,1 1 1 Structure du cholest rol 22. 1 1 2 Distribution cellulaire du cholest rol 23,1 1 3 Les microdomaines riches en cholest rol 23. 1 2 M tabolisme cellulaire du cholest rol 25,1 2 1 Biosynth se du cholest rol 25. 1 2 2 R gulation de la quantit cellulaire de cholest rol 27. 1 2 3 Cycle d hydrolyse et d est rification du cholest rol 28. 1 2 4 Oxydation du cholest rol les oxyst rols 29,1 2 4 1 Formation des oxyst rols 30. 1 2 4 2 Implication des oxyst rols au cours de l ath rogen se 31. 1 2 4 3 R gulation du m tabolisme intracellulaire du cholest rol par les. oxyst rols LXR et OSBP 31, 1 3 Le transport intracellulaire du cholest rol 33.
1 3 1 Les diff rents modes de transport intracellulaire du cholest rol 33. 1 3 2 G n ralit s sur les lipoprot ines 35,1 3 3 Endocytose des LDL par les macrophages 36. 1 3 3 1 Les LDL et LDL oxyd es 36, 1 3 3 2 Endocytose des LDL les diff rents r cepteurs et m canismes 37. 1 3 3 3 La voie endocytique 39, 1 3 4 Le transport du cholest rol partir des endosomes tardifs 40. 1 3 5 Le transport du cholest rol partir de la membrane plasmique 41. 1 3 6 Le transport du cholest rol partir du r ticulum endoplasmique 42. 1 3 7 Efflux du cholest rol 42, 1 3 7 1 Efflux m di par les transporteurs ABCA1 ABCG1 et ABCG4 43. 1 3 7 2 Efflux m di par le r cepteur SR BI 45, Chapitre 2 G n ralit s sur les acides gras et les phospholipides 47.
2 1 Les acides gras 47, 2 2 Les phospholipides classes sous classes et composition en acides gras 52. 2 3 M tabolisme des phospholipides 55,2 3 1 Biosynth se des phospholipides 55. 2 3 2 Remodelage des phospholipides 58,2 3 2 1 Les phospholipases 58. 2 3 2 2 Voies de d acylation r acylation 60,2 3 2 3 Voies de transacylation 61. J r me Bouvier,Institut National des Sciences Appliqu es 7.
M moire de th se 2008,Chapitre 3 L acide docosahexa no que DHA 62. 3 1 G n ralit s sur le DHA 62,3 1 1 Origine du DHA 62. 3 1 2 Distribution du DHA 62, 3 1 3 Incorporation du DHA dans les phospholipides in vitro et in vivo 63. 3 2 R le des acides gras om ga 3 dans l incidence des maladies. cardiovasculaires 64,3 2 1 Les tudes pid miologiques 65. 3 2 2 Les tudes cliniques 65,3 2 3 Les m canismes physiologiques mis en jeu 66.
3 3 R les cellulaires du DHA 67, 3 3 1 Structure et dynamique mol culaires du DHA dans les membranes 67. 3 3 2 Modification des propri t s membranaires 68,3 3 3 DHA et microdomaines membranaires 68. 3 3 4 Le DHA comme m diateur lipidique et activateur de g nes 69. 3 3 5 R le du DHA dans le m tabolisme intracellulaire du cholest rol 70. Chapitre 4 Le Bis Monoacylglyc ro Phosphate BMP 71. 4 1 D couverte distribution et localisation subcellulaire du BMP 71. 4 1 1 D couverte et distribution du BMP 71,4 1 2 Localisation subcellulaire du BMP 71. 4 2 Structure du BMP 72,4 2 1 Le squelette glyc rophosphate 72. 4 2 2 La position des cha nes acyles 74,4 2 3 La composition en acides gras 75.
4 3 La voie de biosynth se du BMP 75,4 4 M tabolisme du BMP 79. 4 4 1 Modifications pathologiques et induites du BMP 79. 4 4 2 D gradation enzymatique et remodelage des acyles gras du BMP 81. 4 5 Le r le cellulaire du BMP 82,Chapitre 5 La peroxydation lipidique 86. 5 1 Les esp ces r actives d riv es de l oxyg ne ROS 86. 5 2 M canismes de la peroxydation lipidique non enzymatique 86. 5 2 1 Les diff rentes phases 87,5 2 2 Les anti oxydants 88. 5 3 Les produits d oxydation des AGPI 89,5 3 1 Oxydation enzymatique des AGPI 89. 5 3 2 Oxydation non enzymatique des AGPI 91, 5 3 2 1 Conservation de la structure de l acide gras 91.
5 3 2 2 Alt ration de la structure de l acide gras 92. MATERIELS ET METHODES 94,1 Produits sp cifiques 95. 1 1 Standards lipidiques 95,1 2 Mol cules radioactives et consommables 95. 1 3 Consommables pour la culture cellulaire 96,J r me Bouvier. Institut National des Sciences Appliqu es 8,M moire de th se 2008. 1 4 Produits sp cifiques pour la microscopie fluorescence 96. 1 5 Produits divers 96,2 Mat riels Biologiques 97,2 1 La lign e cellulaire RAW 264 7 97.
2 2 La lign e cellulaire BHK 21 97,2 3 Les lipoprot ines 98. 2 3 1 Pr paration des lipoprot ines 98,2 3 2 Ac tylation des LDL 98. 2 3 3 Marquage des LDL avec du 3H cholest ryl ol ate ou du 3H cholest rol 99. 2 4 Animaux et traitements 99, 3 Pr paration des liposomes de phosphatidylglyc rol PG 100. 4 Traitements des cellules et protocoles exp rimentaux 101. 4 1 Incubation en pr sence de l anticorps anti BMP 101. 4 2 Incubation en pr sence de U18666A et de F1394 101. 4 3 Incubation en pr sence de liposomes de PG vitamine E 102. 4 4 Incubation en pr sence de DHA non est rifi vitamine E 102. 4 5 Culture des cellules dans des conditions oxydantes 102. 5 Etude du m tabolisme et du transport intracellulaire du cholest rol 103. 5 1 Mesure de l accumulation de cholest rol libre et d esters de cholest rol 103. 5 2 Mesure de la captation des LDL et de l hydrolyse des esters de. cholest rol 103, 5 3 Mesure de l est rification du cholest rol d riv de la captation des LDL 104. 5 3 1 Premi re m thode utilisation de 3H FC LDL 104. 5 3 2 Deuxi me m thode utilisation du 3H ol ate 104. 5 4 Mesure de l efflux m di par les HDL ou la m thyl cyclodextrine 105. 5 5 Traitement des cellules avec la cholest rol oxydase 105. 5 6 Mesure de la sensibilit des cellules avec l amphot ricine B 106. acide docosahexa no que et cholest rol Relations m taboliques et fonctionnelles dans late endosomes to plasma membrane and endoplasmic reticulum Moreover BMP selectively incorporates docosahexaenoic acid DHA 22 6n 3 whose cardiovascular benefits have been reported in Humans We here report that high supplementation of DHA both in vitro and in vivo stimulate the formation of the

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